1、分离和鉴定消臭细菌作用于有机硫化物恶臭摘要:应变jii筛选出不同气味的来源,可以有效降解甲基硫醇及乙基硫醇,但没有能力清除二甲硫化物.结果表明,该菌株jii单单能破坏CSH结合.最适温度和pH值是20-30,6.0-8.3范围.系统识别方法16SrDNA比较,脱臭细菌进出. 16srDNA分析应变jii呈现最高水平97%.关键词:16SrDNA; 甲级硫醇; 硫醇介绍挥发性有机硫化物排放的废水处理厂. 木材制浆产业. 炼油厂及下水道不单单损害. 但是也是造成工人和附近的居民健康问题(乔安娜,2001). 有三种方法用于气味控制. 生物,化学,物理方法. 现在的重视生物法除臭处理,由于其高效率,
2、而且被环境可接受性. 脱臭细菌起着关键作用的生物除臭技术. 八十年代以来,许多高效率除臭硫化物的细菌已被暴晒和驯化,例如硫杆菌thioparus DW44(Kyeoungpsuk，1 992)，硫杆菌thioparus strain HA43(Cho， 1991) 和硫杆菌thioparus strain CH11(Chung， 2001； 1996) 分离泥炭除臭生物滤池，硫杆菌 thioparus TK-m (Gould,1992；Kanagawa，1989)and 硫杆菌 thiooxidans(Kyung-suk,2000)来自活性污泥 硫杆菌thioparus Strain E6(S
3、mith，1988)from limicola 来自湖里. 硫杆菌thioparus Strain T5(Cho，1991；Chung，2001)来自海里的淤泥等等MM(甲硫醇)，DMS(二甲基硫化物)，污染的空气中硫化氢可以被自养的细菌有效地去除.可是.他们大多数通常难以成为主因为它们的增长率均明显低于细菌.一些细菌分离分解有机硫化物恶臭.例如假单胞菌 acidovorance(Zhang， 1991； Kanagawa， 1982)，Hyphoicrobium sp.Hyphoicrobium spS(De Bont，1981)，Hyphoicrobium sp.EG(Suylen， 19
4、87)， Hyphoicrobium sp155(Pedemen1995)and Xanthomonas sp(Kyeoungpsuk， 1992)etc.Hyphoicrobium sp(De Bont，1981)能够使二甲基硫化物转化为甲醛和甲硫醇 及产物甲硫醇更进一步氧化成甲醛和二价硫离子 Xanthomonas spp具有特殊的代谢途径,可以氧化甲硫醇至聚硫化物.这与天然的硫磺相似. 铜绿acidovorance只能把DMDS(二甲基二硫)退化为二甲基硫化物但不能进一步分解成二甲基硫化物. 其短培养时期.所有这些消臭细菌已被接种入生物滤池改善去除降解恶臭.作为最孤立消臭细菌有很狭窄范围
5、选择性有机硫化物恶臭,失去筛查工作需要 为了获得高效率,质量好消臭硫酸细菌.这细菌有待进一步鉴定和分类. 16SrDNA基因试剂盒使细菌鉴定的基础上,它们的16SrDNA 因子顺序. 染色体的DNA的提取细菌先通过PCR的方法,然后分子利用分类 16SrDNA基因技术是更精确和更快速比生理和形态学鉴定. 1材料和方法1.1消臭细菌来源 下列材料被剥削的启动培养基进行分离有机硫化物分解细菌: 泥炭消臭生物滤池,泥泞的松花江,黑粘土,活性污泥和牛粪. 1.2浓缩丰富的文化准备如下:500毫升瓶,每200毫升LB培养基与瓶塞和此时10毫升乙硫醇的产物装进瓶子通过印章使用注射器. 1.3实验仪器实验设
6、备在这方面的工作表现在.1.每个暂停-生长反应堆由一个高40cm直径5cm的圆杯.在底部的一个反应堆喷射石头附在驱散 硝酸盐空气进入反应堆.反应堆是厌倦和0.5升营养液添加到通过管口放在每天包含所有必要大量营养和微量营养元素来米. ET(乙硫醇)或二甲基硫化物在一个小瓶子再放进广口瓶和引入空气.进乙硫醇或二甲基硫化物浓缩再由由空气稀释甲硫醇(99%),撤销了蠕动泵,并混合空气,创造适当的混合气浓度. 1.4分析方法 乙硫醇的浓度和甲硫醇测量用气相色谱仪(层析n2000,浙江大学)配备了不锈钢栏 和火焰电离检波器. 瓷砖操作条件所定:注射器200度, 圆柱80度. 瓷砖pH值是用PHS-3C类型
7、PH计硫酸盐含量的测定硫酸钡光度计.2 结果与讨论2.1选择和生物性状的菌株JII结果表明,筛选到32株细菌可以生活在高浓度乙硫醇富集培养, 其中有8株可降解乙硫醇.稳定及高效率的除臭细菌是靠多次反复传输.甲硫醇天然气(50毫克/立方米)的供应 每度0.4立方米/小时的曝气管中炬接种(图1). 气泡到达 表面4秒.初期低去除往往归因于适应期的细菌以习惯于 新条件.但, 5小时后甲硫醇的反应去除效率超过70%. 后均衡 就是到了甲硫醇的去除率维持稳定而持续在80%一84%. 比较10%去除甲硫醇的营养液无注射,如被证明是非常有益的恶臭甲硫醇去除. 和甲硫醇相同,JII能降低乙硫醇的效率.经过7小
8、时的运转, 乙硫醇的去除率达到最大的72%与业务条件之一: 进气,流速0.5米/小时,一个四口气体浓度35毫克/立方米. 但菌株无能力消除二甲基硫化物,如表fig.2.因此,这项研究表明,应变jll似乎破坏C-SH.更多负离子含有硫在反应器污水啤酒等;过程中生物递级降解 甲硫醇和乙硫醇. 该反应堆PH价值6.8-7.4在运作之前, 运作时PH值介于6.4至7.1. 2.2 JII的形态和生理特性 扫描电子显微照片和显微照片的细菌列fig.3和fig.4. 他们形态特征如下: 菌落形态于营养琼脂平板误差小于1毫米,柠檬黄,半透光,圆圆的,经常整,亮晶晶的一个四高凸; 旧殖民地轮流布朗 ; 细胞形
9、态,杆形0.5通过0.8-1.0微米; 稳定,无鞭毛杆; 革兰氏阴性菌; 非孢子形成; 有氧.温度和PH值对生长影响.最适JII生长发生在20-37,pH值6.0-8.3. 3结论在这项研究中,我们成功地运用LB培养含有乙硫醇高效脱臭菌:应变JII.这能有效降解甲硫醇和乙硫醇. 他们去除率仍可以达到84%和72%,在各地.运转激活淤泥.但应变生病没有能力消除二甲基硫化物.结果证明JII似乎只有破坏C-SH结构. 乙硫醇 而化学计算的氧化成硫酸根,生物递降分解过程.JII的最适合PH值在6.0-8.3. 该隔离群种被怀疑是黄质菌属.基于形态和生物化学的特征.但是,生化菌种鉴定比较困难和强烈. 所以, 应变菌属JII 16SrDNA基因序列,表明这是一个新的密切关际的物种. 13
